ПЦР - диагностика вирусной инфекции, коронавируса - наглядное объяснение метода
Vložit
- čas přidán 8. 05. 2020
- Полимеразная цепная реакция (ПЦР) - метод молекулярной биологии, позволяющий добиться значительного увеличения малых концентраций определённых фрагментов нуклеиновой кислоты (ДНК) в биологическом материале.
Есть желание поддержать канал? Смелей проходи по ссылкам:
ЯндексДеньги: yasobe.ru/na/podderzhi_communi...
VKPay: vkpay#action=transfer-...
Группа ВК: cormedicale
Инстаграм: / cor_medicale
Оригинал тут:
• Polymerase chain reaction
Ролик не претендует на замену учебника, лекций и статей.
Есть какие-то конструктивные комментарии, пожелания, уточнения - смело пишите!
Автор совсем не претендует на всезнание, просто хочет помочь и надеется, что помогает.
Отличное объяснение. Огромное спасибо!
что понятного то, решили вот так говорить,сговор, а на самом деле толком ничего не знают, предположили ,якобы по виду магнитофонной ленты, эти днк,а вирус вообще ИИ нарисовал
Каждый день нахожу что-то но новенькое, но всё так же, по-старенькому, подтверждающее на сколько я тупой.
Очень понятно) Спасибо
Спасибо! Объяснили доступным простым языком, осталось добавить терминологии ☺️
Ф
Очень интересно, спасибо
Спасибо 💝
Спасибо большое за доступную информацию, вы большие молодцы)
а что тут доступного? а как понять там был коронавирус? нихуя не понятно. он объяснил процесс пцр. но не объяснил каким образом нужно выявлять есть там коронавирус или нет... оъясняю свою точку. мазок из носоглотки взяли - да. добавили ферменты нуклеотиды и праймеры и биоматериал полученный из носоглотки. цпр возьмёт и преумножит био материал полученный из носоглотки даже если там нет коронавируса. и как тут понять был там вирус или нет. не рассказал как потом изучать этот полученный раствор ПЦР? электрофорезом?
@@sanzhar4710 Они находят "лишние" молекулы... но они не знают какие они... и "любое" не объяснимое отклонение автоматически становится ковид = полный бред и идиотизм.
@@sanzhar4710 Как было сказано, в "котёл" добавляют праймеры, которые представляют собой комплементарную последовательность участка РНК вируса, эти последовательности достаточно большие и являются чем то вроде ключа, который запустит весь дальнейший процесс амплификации. В противном случае, если РНК вируса нет, то и праймеру не к чему будет присоединиться, так как он специфичен именно к вирусной РНК
@@mendeleevchromovich2041 получается праймер это Нное количество (определенный участок РНК вируса) нуклеотидов вируса так? значит праймер это частично уже разрушенный РНК вируса. я все правильно понял? если я правильно понял в виде тестов продают странам те самые праймеры. спасибо Хромович.
@@sanzhar4710 Не совсем так. Праймер - это просто последовательность из нуклеотидов, синтезированная искусственно, которые комплементарны к участку на вирусной РНК (принцип комплементарности А=У, Г=-Ц).
Если, например, нужно будет диагностировать какой то другой вирус, то и праймер к нему будет отличаться (в зависимости от генома вируса).
Все было понятно и познавательно!
Часть про Covid-19 не смотрел, а вот за объяснение ПЦР большое спасибо - теперь намного понятнее
czcams.com/video/z_FExIdgki8/video.html - сам изобретатель пцр теста Кэри Муллис о своём тесте - для чего он предназначен
А как интерпретировать результаты пцр?
С чего взяли что праймеры не могу соединится еще с какой то цепочкой?
Браво
Не понятно, как по полученному в результате ПЦР исследования материалу (кускам РНК) индентифицируют вирус
Все просто, вирус встраивает свой геном в геном хозяина, а значит у зараженного должны быть куски РНК, которые есть у данного вируса. Вот их и определяют.
@@user-tn3hr8qm2u И? Мало ли когда человек мог переболеть этим вирусом или даже не переболеть но получить эти "куски РНК". Этот тест ничего ровным счетом не доказывает. А у нас на нём основывают всю "пандемию", количество зараженных по этим тестом считают.
@@user-mo1mm3no1d последовательности РНК вируса не могут быть у здорового человека, так как они специфичны для ковида, люди их не имеют. Когда человек выздоравливает - клетки, которые содержали данные последовательности уничтожаются иммунной системой. Следовательно, ни у здорового человека ни у переболевшего данных РНК быть не может.
@@MrRenics а кто говорил, что я знаток ковида, я по работе только ПЦР занимаюсь это во-первых. Во - вторых насколько мне не изменяет институский курс вирусологии, короновирусные инфекции в своем геноме имеют гены, которые как раз таки кодируют их специфическую оболочку. А не у каждого как вы выразились "ОРВИ вируса" есть такая оболочка.
@@MrRenics Можно пожалуйста без вашей излишней агрессии. Я как бы и не говорил, что я вирусолог. А то что я с вами сейчас тут сижу... Так а что еще делать, когда лаборатория переквалифицирована под диагностику ковида ?
Будет получено большое количество не молекул ДНК, а её кусков☝🏻. Это большая разница. Вот почему образец днк папайи и козы дал положительный результат на covid.
Ты бы ещё знал, что вирусов не существует в природе. И нет ни 1 инфекционной болезни.
@@user-jd1wn9rt7n а можно ссылку на источник информации?
@@MINYAD1 а может вопрос поставить по другому? С чего ты взял что вирусы существуют?
@@user-jd1wn9rt7n ему понравилось что, всех кошмарят теорией о вирусах)))
@@gtnmgtymrjdsq5383 так люди не изучили корень вопроса, а мелят второй год о фейковых вирусах. Но мало кто говорит правду, что их не существует
Смесь не нуклеотидов, а смесь из дезоксинуклеозид 5'-трифосфатов, которые в процессе амплификации достраивают днк с помощью Taq полимеразы.
Скажите пожалуйста, если у заболевших, разных людей разными вирусами, с разными симптомами ставят всем диагноз ковид на основании мазка - то получается - всё равно, чем ты болеешь - гриппом, ОРВИ, любым вирусом - диагноз будет ковид? Я к тому, что теперь все простудные вирусы обзываются ковидами? Я болею всеми инфекциями дыхательных путей, которые начинаются в народе - 4-5 раз в году! Мазок может определить - где грипп, где ОРЗ 1, ОРЗ 2? Или это всё ковиды?
Конечно, мазки показывают,каким вирусом Вы болеете.
всё сейчас обзывать ковидами неправильно. необходимо проводить диагностику тщательную и по факту. тут зависит от врача который на основании наблюдаемых симптомов направит вас на правильную диагностику а соответствено потом назначит правильное лечение. а так да мазок при помощи данных методов (тот де пцр) поможет в идентификации возбудителя вирусных заболеваний.
@@callahan4954 😢 эх то
АЦТГ - это нуклеиновые основания, а не нуклеотиды. Нуклеотид - эта уже с углеводом и фосфоэфиром)
Враньё состоит в том что вероятность точного определения прямо пропорционально количеству анализов и обратно пропорциональна точности постановки опыта.
Погрешность ПЦР очень высокая, в идеале - минимум 30%, и это не считая всяких "мелких брызг" в виде человеческого фактора, условий хранения материала и условий выполнения анализа. Т.е. каждый третий результат заведомо недостоверный при полном соблюдении всех требований к проведению исследований. Так что требования делать ПЦР-тесты без показаний - это просто отъем денег у населения.
я не понял, в мазке может содержаться огромное количество разных днк. Но каким то волшебным образом выделяется нужный днк или рнк. Где гарантии тог, что размножается то что нужно а не то что есть ещё что то? Я не понимаю. А если смешать несколько образов днк разных животных и сделать пцр, что выйдет в итоге ?
Нет ПЦР уникален только определение одного вида ДНК а разных то не поспорю могут быть ошибки но это же не механическая работа ПЦР исключительно работает для 3 основных этапов по заданным циклом и ещё он ограничен только идентичных одного вида
@@user-eb2ek7km6y ещё раз, не понимаю я. как выделяется конкретное ДНК из кучи разных ДНК ?
@@Oleg-lq8zk определенный кусок ДНК получают копии на амплификации с помощью праймеров 18-25 нуклеотидов схватывается taq полимеразы и восполняют новыми цепями а старые отжигаются праймерами специально маркеры есть для них, но сложности состоит как раз такие в праймерах это короткие последовательности ДНК которые синтез происходит на последовательности определённой молекул и прямого и обратного праймера их обрабатывают точнее так сказать иной раз лизируют либо ещё зависит от праймера выбранного маркера и от вида фермента которые их режут последовательно, просто это видео обобщенно показывают сущность ПЦР но они ещё делятся ОТ ПЦР это обратный транскрипции ПЦР где выделяют РНК вместа ДНК соответственно праймера другие потому как все зависит от нуклеотидных последовательности все от них идёт комплементарность, экспрессия и суксесия и блотинг ДНК и тогда ли
@@All__________ именно так. У нас есть 4 варианта нуклеотидов. Условно предположим, что нуклеотиды в ДНК человека располагаются в случайном порядке. Тогда попробуем посчитать, как часто мы будем находить в ДНК последовательность той или иной длины. Логично, что один нуклеотид в среднем будет встречаться по разу на каждые четыре нуклеотида, то есть вероятность 1/4, это достаточно часто. Теперь посчитаем для цепочки из двух нуклеотидов. Вероятность встречи первого нуклеотида 1/4, вероятность того, что за ним будет идти тот же, что и в нашей искомой последовательности так же 1/4. По правилам комбинаторики перемножаем вероятности и подумаем общую вероятность нахождения двух нуклеотидов в 1/16. Посчитаем дальше:
3: 1/64
4: 1/256
5: 1/1024
6: 1/4096
7: 1/16384
8: 1/65536
9: 1/262144
10: 1/1048576
11: 1/4194304
12: 1/16777216
13: 1/67108864
14: 1/268435456
15: 1/1073741824
16: 1/4294967296.
Ну и вот, за 16 шагов мы достигли вероятности 1 к 4 млрд, что уже больше, чем 3 млрд человеческого генома. Представьте, какой длины будет число, если продолжать увеличивать длину праймера дальше. А это только один праймер, а для проведения ПЦР нужны 2-3 праймера, если не хватит хотя бы одного, результата не будет. Короче, вероятность того, что совпадут все праймеры длиной 20-30 нуклеотидов практически отсутствует.
@@All__________ так и праймеры не от балды выбираются. Смотрят, чтобы последовательность была уникальной для конкретного организма, в данном случае коронавируса. При этом для того, чтобы зарегистрировать тест-систему, её испытывают на специфичность, чтобы она не давала ложноположительных не только на здоровых людях, но и на людях, зараженных другими коронавирусами, но не представляющими такой опасности, как этот. И ничего, даже при том, что эти коронавирусы родственны друг другу, находятся уникальные участки РНК, на которые и делаются праймеры. Вы к чему упоминали про 3млрд пар нуклеотидов? Разве не к тому, что, как Вам казалось, там высока вероятность встретить любую комбинацию из 30 нуклеотидов?
А куда девают " розмноженную" РНК? Или она уже не патогенна?
Интересно как проводится ПЦР к ВИЧ если вирус не выделен и его РНК не известно?
а земля круглая?
Амплификация - удвоение цепочки ДНК.
128-ой лайк, хорошее видео, информативное
А зачем связи между нуклеотидами разрывать?
чтобы получить 2 отдельные одноцепочечные ДНК, которые будут служить матрицей, для построения второй цепи ДНК к каждой матричной за счет комплементарных связей, которые мы специально разорвали, чтобы присоединить вторую
@Relaxing Videos О каких последствиях речь?
Мы ведь специально разъединяем, вносим вещества, чтобы получить множество копий ДНК
@Relaxing Videos Если ваша ДНК совпала с ДНК на месте преступления, то зависит от тяжести преступления то, как долго вы будете в тюрьме
@Relaxing Videos Где захотите, там и будет
Тест на ПЦР? У меня у брата м8 G16 после месяца тяжкого протекания болезни но при этом ПЦР Показывает ОТРИЦАТЕЛЬНЫЙ результат... ломаем голову заразен ли он....
@Vadim Jankulov пцр как выясняется показывает попугаи....
@Vadim Jankulov Либо вирус ушел из глотки и спустился ниже. Если он атакует легкие, накой ему оставаться в носоглотке. Которую он использует только как ворота.
czcams.com/video/z_FExIdgki8/video.html - сам изобретатель пцр теста Кэри Муллис о своём тесте - для чего он предназначен
@Vadim Jankulov чушь собачья. ничего он не показывает. czcams.com/video/z_FExIdgki8/video.html - сам изобретатель пцр теста Кэри Муллис о своём тесте - для чего он предназначен
Куда потом сливают триллионы днк? В водопровод? Покажите!!!!
@Vadim Jankulov а можно по подробнее как?
Про утилизацию интересно и мне
Я так понимаю, что они набирают готовый материал, который можно использовать для генетической модификации человека или бактерий.
@@user-si9if9oj2p а меня смущает, что вся информация о днк уже загружается в компьютер и собирают согласия на телемедицину.
@@user-ls3oq2qt9t да и генетический анализ сделают, и загрузят в базу.
стойте-ка! как это белок кодируют 4 нуклеотида? Разве не три!?!?!? Я в замешательстве!
Белок кодируют сто тыщ миллионов нуклеотидов.
czcams.com/video/z_FExIdgki8/video.html - сам изобретатель пцр теста Кэри Муллис о своём тесте - для чего он предназначен
Ответьте наконец-то, ПЦР плохо или хорошо????
Нихуя не понятно, но ужасно интересно! :)))
🤣
😁😁😁
Ничего не поняла
И я тоже
Бла бла бла нихуя не понял )))) А ведь у меня вышка Инж-биотех )
Меня больше беспокоит: как они "так легко выявляют" РНК вируса? Откуда известно, что исследуемая РНК не человеческая, откуда известно, что взяли именно ту последовательность?
@@russellkrou78 Так, меня тут уже один раз вычитывали. Геном условного вируса секвенирован. Мы знаем, какая последовательность нуклеотидов кодирует те или иные белки вируса. Любой вирус внедряясь в клетку носителя, встраивает в геном свои последовательности нуклеотидов. После этого клетка реплицирует данный вирус и он распространяется таким же методом на другие клетки. Так как мы знаем нуклеотиды нужного нам вируса, мы можем химически синтезировать нужные нам праймеры. Праймеры обязательно встраиваются напротив начала цепи интересующего нас фрагмента ДНК. И после этого может произойти два варианта:
1. Репликация не идет, так как праймер не комплементарен цепи фрагмента ДНК => гипотеза о наличии интересующей нас последовательности РНК или ДНК( условной последовательности вируса )не подтвердилась
2. Репликация пойдет, так как праймеру удалось комплементарно связаться с фрагментом ДНК или РНК, что говорит о наличии интересующей нас последовательности нуклеотидов во фрагменте.
Я надеюсь, я понятно обьяснил =)
@@user-fy3ph3bj5n аппеляция к авторитету в виде нобелевской премии в данном случае не работает, так как ваш Кэри Мулес был вич-диссидентом, и игнорировал все аргументированные доводы в пользу существования вич-инфекции